犬elisa檢測(cè)試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡練、作用區(qū)分客觀等要素,適宜于大規(guī)模篩查實(shí)驗(yàn)又能夠用于少數(shù)標(biāo)本的檢查,能夠做定性實(shí)驗(yàn)也能夠做定量分析。
犬elisa檢測(cè)試劑盒的技術(shù)原理:
1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
2、結(jié)合在固相載體表面犬elisa檢測(cè)試劑盒的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
3、酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
4、受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
5、此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6、加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有犬elisa檢測(cè)試劑盒很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
優(yōu)點(diǎn):
1、準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900
2、靈敏度:最小檢測(cè)濃度小于
3、特異性:不與其它可溶性ELISA試劑盒結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)
4、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%
5、貯藏:2-8℃,避光防潮保存
操作需注意:
1、不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照說明書嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性;
2、若不同批號(hào)的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形;
3、反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),第1孔和最后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大;
4、臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正常現(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢;
5、加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大,建議校對(duì)加樣器。